تفاوت PCR معمولی و Real-Time PCR در تشخیص FIP در گربهها
اهمیت تشخیص دقیق FIP
Feline Infectious Peritonitis یکی از پیچیدهترین و چالشبرانگیزترین بیماریهای ویروسی گربهها است که تشخیص قطعی آن نیازمند تفسیر صحیح یافتههای بالینی، آزمایشگاهی و مولکولی میباشد. استفاده نادرست یا تفسیر غلط PCR میتواند منجر به تشخیص اشتباه یا تأخیر در شروع درمان گردد.
PCR معمولی (Conventional PCR)
PCR معمولی تنها وجود یا عدم وجود RNA ویروس کرونا گربهای را شناسایی میکند. خروجی این تست صرفاً کیفی است و اطلاعاتی در مورد شدت تکثیر ویروس، فعالیت بیماری یا ارتباط آن با FIP فعال ارائه نمیدهد. مثبت شدن PCR معمولی میتواند در گربههای سالم حامل کروناویروس نیز مشاهده شود و بهتنهایی ارزش تشخیصی قطعی برای FIP ندارد.
Real-Time PCR (qPCR)
Real-Time PCR علاوه بر شناسایی ویروس، امکان اندازهگیری بار ویروسی را فراهم میکند. نتیجه این تست بهصورت Ct value یا عدد بار ویروسی گزارش میشود. هرچه Ct پایینتر باشد، میزان تکثیر ویروس بیشتر بوده و احتمال بیماری فعال افزایش مییابد. qPCR ابزار کلیدی در تفسیر بالینی FIP محسوب میشود.
تفاوتهای کلیدی PCR معمولی و Real-Time PCR
ماهیت نتیجه
PCR معمولی نتیجه مثبت یا منفی ارائه میدهد، در حالی که Real-Time PCR امکان ارزیابی کمی بار ویروسی را فراهم میسازد.
ارزش بالینی
PCR معمولی بیشتر نقش غربالگری دارد اما Real-Time PCR نقش تصمیمساز بالینی در FIP ایفا میکند.
قابلیت تفسیر شدت بیماری
PCR معمولی قادر به افتراق بین آلودگی ساده و بیماری فعال نیست، در حالی که qPCR در کنار علائم بالینی این امکان را فراهم میکند.
تشخیص FIP با PCR
هیچ نوع PCR بهتنهایی تشخیص قطعی FIP محسوب نمیشود. ارزش تشخیصی PCR به نوع نمونه بستگی دارد. PCR خون محیطی حساسیت و اختصاصیت پایینی دارد. PCR مایع افیوژن شکمی یا پلور، نمونه بافتی و سلولهای ماکروفاژی بیشترین ارزش تشخیصی را دارند. PCR هدفمند جهشهای مرتبط با FIP نسبت به PCR عمومی کروناویروس اختصاصیتر است.
لود ویروسی بالا در FIP
لود ویروسی بالا در Real-Time PCR، بهویژه در نمونه افیوژن یا بافت، یک یافته بسیار مهم است. این وضعیت در صورت همراهی با علائم بالینی سازگار، هیپرگلوبولینمی و نسبت A/G پایین، قویاً به نفع FIP فعال میباشد.
آیا میتوان لود ویروسی بالا را نادیده گرفت؟
خیر. لود ویروسی بالا در qPCR هرگز نباید نادیده گرفته شود. نادیده گرفتن این یافته میتواند منجر به تأخیر در تشخیص و از دست رفتن زمان طلایی درمان گردد. تنها در مواردی که لود ویروسی پایین بوده و هیچ شواهد بالینی یا آزمایشگاهی دیگری وجود نداشته باشد، تفسیر محتاطانه توصیه میشود.
رویکرد تشخیصی بیمارستان دامپزشکی پرشین پت
در بیمارستان دامپزشکی پرشین پت،
تشخیص FIP بر اساس ترکیب علائم بالینی، CBC، بیوشیمی، نسبت A/G، تصویربرداری، نوع نمونه PCR و بار ویروسی انجام میشود. Real-Time PCR ابزار تکمیلی تصمیمگیری بالینی است و هرگز بهصورت ایزوله تفسیر نمیشود.
جمعبندی تخصصی
PCR معمولی ابزار غربالگری است، در حالی که Real-Time PCR ابزار تفسیر بالینی محسوب میشود. لود ویروسی بالا در qPCR، بهویژه در افیوژن یا بافت، یک یافته مهم و غیرقابل چشمپوشی در مسیر
تشخیص FIP فعال است. تشخیص صحیح FIP همواره نیازمند رویکرد چندعاملی و تخصصی میباشد.
رفرنسها
Merck Veterinary Manual, Feline Infectious Peritonitis
WSAVA Guidelines for FIP Diagnosis
Addie D et al., Feline Coronavirus and FIP